המלך לאונידס (ג'רארד באטלר) מוביל את 300 הלוחמים הספראטנים בקרב תרמופילאי בשנת 480 לפני הספירה, כשהם עומדים מול הצבא הפרסי העצום בראשות המלך חשיארש. הקרב הזה, שנראה כמעט כמשחק אבוד מראש, מתרחש בנקודת מעבר צרה שבה יכולים הספראטנים לנצל את יתרונם הטקטי ולבלום את הפלישה הפרסית. לאונידס, מלך חזק ונחוש, מאחד את לוחמיו בנחישות יוצאת דופן, כשהם נלחמים בעוז ובאומץ לב מול גלים של חיילים פרסיים, במטרה להגן על יוון ולהעניק לה השראה להתאחדות ולהתנגדות משותפת לאיום החיצוני.
הקרב בטרמופילאי אינו רק מאבק פיזי אלא גם סמל לערכים של גבורה, נאמנות והקרבה עצמית. המלכה גורגו (לנה הידי) תומכת ומעודדת את בעלה, בעוד ת'רון (דומיניק ווסט) ודיליאוס (דיוויד וונהם) מגלמים את רוח הלחימה והמסירות לספראטה. למרות שהכוחות הספראטנים קטנים בהרבה, הם מצליחים לעכב את הצבא הפרסי ולהעניק זמן יקר ליתר הערים היווניות להתארגן ולהקים את הדמוקרטיה הראשונה. הקרב משמש נקודת מפנה היסטורית שמאחדת את יוון נגד האויב הפרסי ומעצבת את עתידה. המלך לאונידס (ג'רארד באטלר) ו-300 לוחמיו עומדים בפני סכנה כמעט בלתי נמנעת, אך הם מוכנים להקריב את חייהם למען חירות ארצם. הקרב בטרמופילאי הוא סיפור של גבורה בלתי מתפשרת, של מאבק נגד כל הסיכויים, ושל השראה לכל יוון להיאבק על עצמאותה ועל ערכיה. הקרב בטרמופילאי הפך לסמל עולמי של אומץ והתמדה, כשהספראטנים נלחמים עד טיפת דמם האחרונה. הקרב איפשר ליוון להתאחד ולהקים בריתות שהובילו לניצחונות משמעותיים בעתיד, כמו בקרב סלאמיס. הסרט מבוסס על קומיקסו של פרנק מילר ומשלב אלמנטים ויזואליים מרשימים עם סיפור היסטורי מרגש, המדגיש את חשיבות האחדות וההקרבה למען חירות ועתיד טוב יותר. דמותו של המלך לאונידס, שמגולמת על ידי ג'רארד באטלר, מגלמת את רוח הלוחם האידיאלית והמסירות ללא גבול למדינה ולעם.
