גות'אם סיטי נמצאת במצב של חוסר יציבות לאחר היעלמותו של באטמן, מה שהופך את הרחובות למזמינים במיוחד לפשיעה ולכאוס. הארלי קווין (מרגו רובי), שהייתה בעבר ידועה כבת זוגו של הג'וקר, מחליטה להיפרד ממנו ולנסות לבנות לעצמה חיים חדשים. עם זאת, ההחלטה הזו מושכת אליה סכנות רבות, ובמיוחד את תשומת לבו של בלאק מסק, ראש המאפיה המקומית, שמחליט להכריז על פרס גדול עבור מענה להארלי. במקביל, קאסנדרה קיין, נערה צעירה עם כישורים יוצאי דופן, גונבת פריט יקר ערך שמסבך את חייה ומכניס אותה לסכנה גדולה.
כשדרכיהן של הארלי וקאסנדרה מצטלבות, הן מוצאות עצמן נאלצות לשתף פעולה כדי לשרוד ולהגן על עצמן מפני האיומים שמסביב. במהלך המסע המשותף הן מצטרפות לקבוצה שנקראת "ציפורי הטרף", הכוללת נשים חזקות ועצמאיות שמאבקות במאפיה ובפשיעה הגואה בעיר. יחד הן יוצאות למאבק נועז נגד המאפיה, מנסות לשבור את מעגל האלימות והאיום שמטיל בלאק מסק על גות'אם. הסרט מציג את התפתחותה של הארלי מקווין תלויה בעצמה, שמצליחה למצוא כוח חדש בתוך עצמה ובחברות החדשה, כשהיא מתמודדת עם אויבים מסוכנים ומנסה להחזיר את השליטה לידיה בעיר שהולכת ומתפוררת. הקרב על חייה ועל עתיד גות'אם מתרחש על רקע עולם אפל, מסוכן ומורכב, שבו כל החלטה יכולה להיות עניין של חיים ומוות. במהלך הסרט, הארלי קווין מתמודדת לא רק עם אויבים חיצוניים אלא גם עם הקונפליקטים הפנימיים שלה, כשהיא מנסה להגדיר מחדש את זהותה מחוץ להשפעת הג'וקר. דמויות נוספות כמו רוזי פרז בתפקיד רנט, מרי אליזבת' ווינסטד בתור האנטי-גיבורה הנינג'ה, וג'ורני סמולט שמגלמת את קאסנדרה קיין, מוסיפות עומק ועוצמה לקבוצה. יחד הן מגלות את חשיבות הסולידריות הנשית במאבק נגד הפשיעה והאלימות שמאיימים על גות'אם. הבימוי של קת'הי יאן מדגיש את האנרגיה והסגנון הייחודי של הסרט, שמשלב אקשן, הומור ודרמה חברתית. בסופו של דבר, הסרט מציג מסר של העצמה ושחרור, כשהארלי וכל חברותיה מצליחות לשבור את הכבלים שמחזיקים אותן בעבר ולצעוד לעבר עתיד חדש וחופשי יותר.
